1.准备工作:准备所需的培养器具和试剂,包括培养基、无菌培养瓶、离心管、移液器、无菌操作台等。
2.预热培养基:将所需的产品取出,并在无菌条件下预热至适当的温度。一般来说,37摄氏度是常用的培养温度。
4.细胞计数和离心:使用细胞计数仪对细胞进行计数,并根据需要的细胞密度调整细胞悬液的浓度。然后,将细胞悬液离心,去除上清液。
5.建立培养体系:将调整后的细胞悬液加入预热的无血清培养基中,使细胞悬浮在培养基中。根据需要,可以添加适当的生长因子或其他辅助物质来促进细胞生长和增殖。
6.培养和观察:将含有细胞的培养瓶放入恒温培养箱中,并在适当的温度和湿度条件下培养细胞。定期观察细胞的生长情况,包括细胞形态、细胞聚集情况和颜色变化等。
7.更换:根据需要,定期更换,以去除代谢产物和维持细胞的健康状态。更换时,可以用无菌缓冲液轻轻冲洗细胞,以去除细胞附着在培养瓶底部的细胞碎片和代谢产物。
8.细胞传代:当细胞达到一定的密度或生长状态时,可以进行细胞传代。传代过程中,将细胞从原始培养瓶中取出,用无菌缓冲液洗涤细胞,并将细胞重新分装到新的培养瓶中,加入新的产品。
间充质无血清培养基
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