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酶切位点 、酶切位点保护碱基

   日期:2023-04-10     浏览:27    评论:0    
核心提示:我问一个很蠢的问题,酶切位点到底是什么,是所有的基因序列上都有的特定碱基序列吗?一般所说的酶切位点。就是限制性内切酶所能切开的DNA序列,基因工程中所用的限制性内切酶位点大多都是专一性的,只能识别某特

我问一个很蠢的问题,酶切位点到底是什么,是所有的基因序列上都有的特定碱基序列吗?

一般所说的酶切位点。就是限制性内切酶所能切开的DNA序列,基因工程中所用的限制性内切酶位点大多都是专一性的,只能识别某特定序列,并且在该序列的特定部位切开。

酶切位点有些基因里面有,有些基因里面没有,不一定的。现在基因工程里面,利用酶切位点可以方便地把基因切下来装上去,以此来改造质粒载体。所以质粒载体上都会故意留着酶切位点,或者在基因两端人为地加上酶切位点。

要想知道限制性内切酶位点的发展和具体操作方法,百度一下就有很多。

酶位切点是什么意思?

应该是【酶切位点】(Restriction Enzyme cutting site):DNA上一段碱基的特定序列,限制性内切酶能够识别出这个序列并在此将DNA序列切成两段。可能存在同尾酶,不同酶的识别序列不同,有的可能能识别多个酶切位点比如STY1识别序列有WW。

意思是通过以上方法将DNA序列切成两段!

引物设计时如何添加酶切位点

1、添加额外的碱基序列,即保护碱基,用来提高将来酶切时的活性。添加保护碱基,需要考虑两个因素:一是碱基数目,一是碱基种类。不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求。

2、相邻的两个酶切位点不同时使用。在分子克隆实验中选择载体的酶切位点时,相邻的两个酶切位点往往不能同时使用,因为一个位点切割后留下的碱基过少以至于影响旁边的酶切位点切割。

扩展资料

保护碱基添加原则:

添加保护碱基,需要考虑两个因素:一是碱基数目,一是碱基种类。

添加保护碱基时,最关心的应该是保护碱基的数目,而不是种类。

添加保护碱基,如果严格点,是根据两条引物的Tm值和各引物的碱基分布及GC含量。如果某条引物Tm值偏小,GC%较低,添加时多加G或C,反之亦反。

参考资料来源:百度百科-双酶切

参考资料来源:百度百科-保护碱基

参考资料来源:百度百科-酶切位点

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原文链接:http://www.hzciic.com/news/show-20388.html,转载和复制请保留此链接。
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标签: 碱基 位点 序列
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